PROPIEDADES BLOQUEANTES DE CANALES DE CALCIO Y
SELECTIVIDAD DE NUEVOS COMPUESTOS MARINOS Y SUS DERIVADOS
R. Alvarez1, C. de Austria2, M. del Monte2, D. Alonso2, E. García-Palomero2, R. de Pascual1, A. Martínez2, M. Medina2 y L. Gandía1
1Instituto Teófilo Hernando, Depto. Farmacología; Fac. Medicina, U.A.M.;
2Neuropharma S.A.U., Tres Cantos, Madrid
La alteración en la homeostasia del calcio (Ca2+) es relevante en la patogénesis de enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Alzheimer (EA). Los potenciales beneficios terapéuticos de estabilizar la homeostasia del Ca2+ celular mediante el uso de antagonistas del Ca2+ en seres humanos, sin embargo, no ha mostrado un efecto neuroprotector significativo. La teoría colinérgica de la EA que relaciona la disfunción colinérgica con el déficit cognitivo ha permitido desarrollar inhibidores de acetilcolinesterasa (ACE) para mejorar la función colinérgica pero con beneficios solo a nivel sintomático. Nuestro objetivo es encontrar nuevas moléculas con actividad combinada como inhibidores de ACE y bloqueantes de canales de calcio voltaje-dependientes (CCVD). Postulamos que estas propiedades combinadas pueden ser una estrategia útil para el tratamiento de la EA. Tras una criba de 1750 compuestos marinos se obtuvieron 17 moléculas con actividad neuroprotectora en células SH-SY5Y incubadas con KCl durante 24 h. Aquellos compuestos que mostraron un efecto neuroprotector se estudiaron en células SH-SY5Y cargadas con Fluo-4 para medir su efecto sobre los cambios de Ca2+ intracelular en respuesta a despolarización con KCl. Los compuestos con propiedades bloqueantes de canales de Ca2+ en células SH-SY5Y se evaluaron como bloqueantes de CCVD en células cromafines bovinas (CCB) con la técnica de patch-clamp. Los compuestos aerothionina, homoaerothionina y 11,19-dideoxifistularina aislados de la esponja Aplysina cavernicola, palinurina (Ircinia variabilis) y leucetamol B (Leucetta primigenia) bloquearon de forma parcial (15,3±1,9%; 23,9±5,5%; 13,1±2,1%; 15,2±3,7% y 24,4±3,5% a 10 μM, respectivamente) y dosis-dependiente los CCVD. En presencia de 10 μM de nifedipino, la 11,19-dideoxifistularina (10 μM) y la palinurina (10 μM) produjeron un bloqueo adicional de la IBa (5,9% y 31,3%, respectivamente) indicando un efecto (parcial y total, respectivamente) sobre los CCVD no-L. Para mejorar la posible selectividad sobre los CCVD no-L se sintetizaron los análogos estructurales, el SD-25 derivado de fistularina y el NP0427 derivado de palinurina. El bloqueo por SD- 25 fue dosis-dependiente (0,1% a 3 μM; 19% a 10 μM y 73% a 100 μM) y más potente que el producido por 11,19-dideoxifistularina. En presencia de nifedipino (10 μM) el SD-25 produjo un bloqueo adicional (30% a 10 μM) sugiriendo un efecto sobre CCVD no-L. En presencia de nifedipino y ω-ctx GVIA, el SD-25 mostró un efecto adicional (8,8%) atribuible a un bloqueo de CCVD tipo-P/Q. De forma similar, en presencia de nifedipino y agatoxina IVA se observó un bloqueo adicional (4,8%) que podría corresponder al bloqueo de CCVD tipo-N. Nuestros resultados sugieren que el análogo SD-25 posee interesantes propiedades como posible bloqueante de CCVD no-L, con un efecto parcial sobre CCVD tipo-N y tipo P/Q.