PM534 es un nuevo agente desestabilizador de microtúbulos con alta afinidad y potentes propiedades antineoplásicas .
Hemos determinado la estructura cristalográfica de rayos X del complejo T 2R-TTL con PM534 a una resolución de 2,45 Å. Encontramos inequívocamente la densidad del ligando PM534 en la interfaz intradímera entre la tubulina α y la β de ambos dímeros de tubulina (el dominio de colchicina) dentro del complejo. El dominio de colchicina de tubulina se puede dividir en tres zonas: un bolsillo central y dos accesorios. Mientras que otros ligandos del sitio de colchicina solo se unen a dos de las zonas, encontramos que PM534 se une ampliamente a lo largo de las tres zonas, haciendo múltiples contactos con el dominio terminal N de β-tubulina, la hélice de bisagra central y el dominio intermedio. La interacción de PM534 no afectó la conformación curva general de la tubulina y su mecanismo de acción consiste en impedir la transición conformacional de curva a recta requerida para que la tubulina se una a los microtúbulos introductorios y, por lo tanto, realice sus funciones celulares.7 M −1 a 25̊C. Además, PM534 muestra una potente actividad antineoplásica in vitro, con valores de GI 50 en el rango nanomolar bajo, observados en diferentes líneas celulares de cáncer tumoral humano. Se realizó una prueba de concepto (PoC) in vivo en ratones atímicos nu/nu portadores de tumores H460 (NSCLC) que fueron tratados (intravenosos, los días 0, 7, 14) con diferentes dosis (que van desde 0,75 mg/kg hasta 2,5 mg/kg). mg/kg) de PM534. Los resultados demostraron una fuerte actividad antitumoral inducida por PM534 relacionada con la dosis en este modelo in vivo.
Conclusiones: El mecanismo de acción de PM534 implica una interacción optimizada con el sitio de la colchicina, lo que se refleja en su alta afinidad por el sustrato, siendo esta la razón última de la actividad celular observada. Además, PM534 presenta una potente actividad antitumoral in vitro que se tradujo en un PoC in vivo claramente positivo que resultó en un fuerte efecto antitumoral.
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El nuevo agente antitubulina PM534 exhibe potentes propiedades antitumorales y antiangiogénicas in vitro e in vivo .
PM534 exhibe una potente actividad antitumoral in vitro con un GI medio 50valor en el rango nanomolar bajo en varias líneas celulares de cáncer humano diferentes. Los experimentos de lavado in vitro muestran efectos celulares irreversibles después de 1 h en contacto con el compuesto, lo que obliga a las células a la muerte celular apoptótica probablemente debido a la desorganización del citoesqueleto de tubulina inducida por PM534. PM534 inhibe la migración e invasión de células tumorales in vitro y detiene el ciclo celular en la fase G2/M, obligándolas a la apoptosis. Además, PM534 presenta potentes efectos antiangiogénicos in vitro, inhibiendo fuertemente la proliferación y migración de células endoteliales y la formación de angiotubos. La actividad antitumoral in vivo de PM534 se caracterizó en tumores derivados de seres humanos xenoinjertados en ratones nu/nu atímicos, a saber, mama (MDA-MB-231) y páncreas (Mia-Paca-2). PM534 se administró por vía intravenosa una vez por semana durante tres semanas consecutivas a 5,0 mg/kg. Se observó actividad antitumoral inducida por PM534 in vivo (vs. placebo) en MDA-MB-231 (T/C, 0,3 % el día 28; TV, p<0,0001) y Mia-Paca-2 (21,3 % el día 21; TV, p<0,0001). Además, el tratamiento con PM534 aumentó con significación estadística (vs. placebo) la mediana del tiempo de supervivencia de los ratones portadores de MDA-MB-231 (82 frente a 33 días; p<0,0001) y Mia-Paca-2 (51 frente a 30 días; p =0,0008). Es de destacar que se observaron remisiones tumorales completas en 2/10 (que duraron 11 días y 161 días, cada uno) y 10/10 (que duraron 45 días en 9/10 y 140 días en 1/10) animales tratados con PM534 portadores de Mia- Paca-2 y MDA-MB-231 y tumores, respectivamente. p<0,0001). Además, el tratamiento con PM534 aumentó con significación estadística (vs. placebo) la mediana del tiempo de supervivencia de los ratones portadores de MDA-MB-231 (82 frente a 33 días; p<0,0001) y Mia-Paca-2 (51 frente a 30 días; p =0,0008). Es de destacar que se observaron remisiones tumorales completas en 2/10 (que duraron 11 días y 161 días, cada uno) y 10/10 (que duraron 45 días en 9/10 y 140 días en 1/10) animales tratados con PM534 portadores de Mia- Paca-2 y MDA-MB-231 y tumores, respectivamente. p<0,0001). Además, el tratamiento con PM534 aumentó con significación estadística (vs. placebo) la mediana del tiempo de supervivencia de los ratones portadores de MDA-MB-231 (82 frente a 33 días; p<0,0001) y Mia-Paca-2 (51 frente a 30 días; p =0,0008). Es de destacar que se observaron remisiones tumorales completas en 2/10 (que duraron 11 días y 161 días, cada uno) y 10/10 (que duraron 45 días en 9/10 y 140 días en 1/10) animales tratados con PM534 portadores de Mia- Paca-2 y MDA-MB-231 y tumores, respectivamente.
Conclusiones: Sobre la base de la actividad in vitro frente a diferentes líneas celulares tumorales humanas, la actividad in vivo en tumores humanos xenoinjertados, así como sus propiedades antiangiogénicas, se evaluará la seguridad, farmacología y actividad antitumoral preliminar de PM534 en un first-in -Ensayo clínico en humanos que se llevará a cabo en pacientes con tumores sólidos avanzados .