29 enero 2021

APLIDIN y su Eficacia Frente a la Cepa Británica ( B.1.1.7 ) Host-DirectedTtherapies Against Early-Lineage SARS-CoV-2 Retain Efficacy Against B.1.1.7 Variant .

 Las Terapias Dirigidas Por el Huésped Contra el SARS-CoV-2 de linaje Temprano Conservan la Eficacia Contra la Variante B.1.1.7 .

Ann-Kathrin Reuschl , 1, Lucy G. Thorne , 1, Lorena Zuliani-Alvarez , 2, 3, 4, 5, Mehdi Bouhaddou , 2, 3, 4, 5, Kirsten Obernier , 2, 3, 4 , Margaret Soucheray , 2, 3, 4, Jane Turner , Jacqueline M. Fabius , 2, Gina T. Nguyen , 2, Danielle L. Swaney , 2,3, 4, Romel Rosales , 6, Kris M. White , 6, Pablo Avilés , Ilsa T. Kirby , 2, 3, 5, James E. Melnyk , 2, 3, 5, Ying Shi , 2, 3, 5, Ziyang Zhang , 2, 3, 5, Kevan M. Shokat , 2, 3, 5, Adolfo García-Sastre , 6, 7, 10, 11, # Clare Jolly , 1, Gregory J. Towers , 1, # y Nevan J. Krogan 2, 3, 4, 5, 6, #

Introducción

El síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2), el agente causante de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19), se ha extendido por todo el mundo causando millones de muertes y trastornos sociales y económicos masivos. En septiembre de 2020, se detectó una nueva variante de SARS-CoV-2 en el Reino Unido (Reino Unido), conocida como linaje B.1.1.7. Esta variante se ha extendido rápidamente desde noviembre de 2020 en todo el Reino Unido y ahora comprende hasta el 40% de los casos nuevos de COVID-19 en el sureste de Inglaterra (Public Health England, tercer informe técnico). Fundamentalmente, B.1.1.7 también se ha detectado en numerosos países de todo el mundo, incluidos los Estados Unidos, Europa y Canadá. Número de infecciones B.1.1.7 en rápido aumento y B.1.1.

La secuenciación de la variante B.1.1.7 reveló 23 mutaciones (  ); 17 mutaciones que codifican proteínas (14 mutaciones no sinónimas y 3 deleciones) y 6 mutaciones sinónimas (Figura 1). La mayoría de las mutaciones codificadoras de proteínas (8) se observaron dentro de la proteína Spike viral, que facilita la entrada viral a través de su interacción con el receptor ACE2 humano. Informes recientes han sugerido que los cambios en Spike, especialmente en el dominio de unión al receptor (RBD), encontrados en nuevas variantes de SARS-CoV-2 pueden alterar la sensibilidad de neutralización de anticuerpos y posiblemente la eficacia de la vacuna (  ;  ), aunque esto no parece ser cierto para la mutación N501Y de Spike RBD de la variante  (  ; ). Las otras mutaciones no sinónimas se encuentran en la proteína Nsp3 (3), Nsp6 (1), Orf8 (3) y N (2). El impacto de estas mutaciones en la replicación, transmisión y patogénesis viral aún no se comprende bien. Es fundamental investigar el impacto de estas mutaciones en el ciclo de vida viral y evaluar la eficacia de los tratamientos antivirales candidatos previamente identificados para COVID-19 en esta nueva variante del SARS-CoV-2.

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Mutaciones que codifican proteínas en la variante del virus SARS-CoV-2 B.1.1.7.

A) Mapa del genoma del SARS-CoV-2 (NC_045512.2) que representa marcos de lectura abiertos (flechas violetas oscuras) y proteínas resultantes de la escisión del polipéptido ORF1ab en proteínas no estructurales (violeta claro). Se anotan 17 mutaciones que codifican proteínas (arriba) que incluyen 14 mutaciones no sinónimas y 3 deleciones que abarcan 5 proteínas virales. B) Expansión de la región genómica de la espiga a la proteína N con fines de visualización.

Actualmente, solo las intervenciones inmunosupresoras como la dexametasona han tenido éxito en la reducción de la mortalidad en casos graves de COVID-19 (  ). Sigue existiendo una necesidad urgente de probar y desarrollar nuevas intervenciones terapéuticas para el tratamiento clínico que se dirijan tanto a la replicación viral como a la inmunopatología asociada con un mal pronóstico. Las terapias dirigidas al huésped ofrecen ventajas sobre las que se dirigen directamente al virus, ya que los genes del huésped poseen una menor propensión a mutar y presentan una barrera más alta para la adaptación viral que implica interacciones con cofactores esenciales del huésped. Además, las dianas de hospedadores que pueden administrarse medicamentos a menudo juegan un papel en otras enfermedades, brindando la oportunidad de reutilizar medicamentos aprobados por la FDA y acelerar los plazos de desarrollo de medicamentos.

Anteriormente, nosotros y otros hemos identificado varios factores del hospedador que interactúan directamente con las proteínas del SARS-CoV-2 (  ;  ), o se ven afectados durante el curso de la infección viral. infección (  ). Muchos de estos factores del hospedador están dirigidos por medicamentos aprobados por la FDA, nuevos medicamentos en investigación (IND) o compuestos preclínicos, y han demostrado fuertes efectos antivirales. Por ejemplo, descubrimos que el factor de traducción eucariota eIF4H interactúa con el SARS-CoV-2 Nsp9 e identificamos inhibidores de la maquinaria de traducción eucariota como potentes antivirales contra el SARS-CoV-2, incluida la zotatafina (inhibidor de eIF4A) y la ternatina-4 (inhibidor de eEF1A), un derivado molecular de plitidepsina (aplidina) ( ). La plitidepsina, otro inhibidor de eEF1A aprobado clínicamente en algunos países para tratar el mieloma múltiple ( ), poseía una potente actividad antiviral en varias líneas celulares, células primarias y modelos de ratón ( ). Además, la inhibición farmacológica de la señalización de p38 utilizando ralimetinib y otros inhibidores de p38 demostró una fuerte actividad antiviral, consistente con un marcado aumento en la actividad de la p38-MAP quinasa durante la infección por SARS-CoV-2 (). Aquí, mostramos que plitidepsina, ralimetinib y remdesivir (un análogo de nucleósido antivírico de amplio espectro ampliamente utilizado aprobado para su uso en varios países para el tratamiento de COVID-19) poseen eficacia antiviral contra la variante del virus B.1.1.7.

Resultados / Discusión

Primero tratamos las células Caco-2 del epitelio intestinal con un rango de concentraciones de plitidepsina, ralimetinib o remdesivir antes de la infección por el SARS-CoV-2 de linaje temprano BetaCoV / Australia / VIC01 / 2020 (VIC) o el B.1.1.7 variante (SARS-CoV-2 England / ATACCC 174/2020 aislado) durante 24 horas. La plitidepsina suprimió de forma potente la replicación viral de ambas cepas de SARS-CoV-2 en el rango nanomolar, medida mediante células positivas a la proteína nucleocápside intracelular (% de células N +) mediante citometría de flujo (Figura 2 A) así como la replicación del ARN viral medida por acumulación de ARN E genómico y subgenómico por RT-qPCR (Figura 2 B). También se observó inhibición de la replicación viral con ralimetinib, inhibidor de la dirección p38, con efectos antivirales que se manifiestan a concentraciones de fármaco μM (Figura 2 D y yE).mi). No observamos citotoxicidad en el rango de concentraciones utilizadas para cada inhibidor mediante el ensayo MTT (Figura 2 C y y F).F). Remdesivir, un inhibidor de la polimerasa (Kovic, 2020), se usó como control positivo y también inhibió la replicación de ambos virus de una manera dependiente de la dosis en el rango μM (Figura 2H), como se observó en otros lugares (  ), sin citotoxicidad observada (Figura 2 I). Sorprendentemente, la plitidepsina fue eficaz contra los linajes iniciales y más recientes del SARS-CoV-2 en concentraciones de un orden de magnitud inferior al remdesivir.

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Eficacia antiviral contra SARS-CoV-2 de linaje temprano y variante B.1.1.7 en células epiteliales intestinales humanas Caco-2.

BetaCoV / Australia / VIC01 / 2020 (VIC) o SARS-CoV-2 B.1.1.7 (SARS CoV 2 England / ATACCC 174/2020) replicación después del tratamiento con dosis crecientes de plitidepsina inhibidor de eEF1A, ralimetinib inhibidor de p38 o viral inhibidor de la replicación remdesivir. A , D , G ) Los niveles de infección en presencia de plitidepsina (A), ralimetinib (D) o remdesivir (G) se midieron mediante tinción intracelular para la proteína de la nucleocápsida (N +) del SARS-CoV-2 a las 24 h después de la infección. B , E , H ) Se muestra la replicación de ARN E genómico y subgenómico de SARS-CoV-2 por μg de ARN total medido por qRT-PCR. C , F , yo) La viabilidad celular en ausencia de infección después de la exposición a las concentraciones de inhibidor indicadas se muestra en relación con los controles tratados con DMSO. Las líneas discontinuas indican la replicación viral en presencia de control de vehículo DMSO. Media +/− SEM (n = 3).

Para confirmar que ambos fármacos dirigidos al huésped retuvieron actividades en células competentes de detección innata, probamos su efecto sobre la infección por SARS-CoV-2 en células epiteliales de pulmón humano Calu-3. Esta línea celular es altamente permisible para la infección por SARS-CoV-2, mientras genera una fuerte respuesta inmune innata inflamatoria (  ) similar a la observada en las células primarias de las vías respiratorias humanas (Ravindra et al. 2020). Probamos la concentración no tóxica más alta (> 75% de viabilidad celular) de cada fármaco (Figura 3 A,RE,re,GRAMO),GRAMO), Plitidepsina 6 nM, ralimetinib 6,7 μM y remdesivir 1,1 μM, contra ambos linajes SARS-CoV-2. De forma similar a lo que observamos en las células Caco-2, la plitidepsina retuvo los efectos antivirales más potentes contra B.1.1.7 y BetaCoV / Australia / VIC01 / 2020 (VIC) a concentración nM (Figura 3 B y y C),C), pero los tres fármacos suprimieron eficazmente la replicación de ambos virus (Figura 3 B,,CC,,MImi,,FF,, HH,,YOyo).

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Eficacia antiviral contra SARS-CoV-2 de linaje temprano y variante B.1.1.7 en células epiteliales pulmonares humanas Calu-3.

Replicación viral en células epiteliales de pulmón humano Calu-3 de SARS-CoV-2 BetaCoV / Australia / VIC01 / 2020 (VIC) o SARS-CoV-2 B.1.1.7 (SARS CoV 2 England / ATACCC 174/2020) después del tratamiento con dosis crecientes de plitidepsina inhibidor de eEF1A, ralimetinib inhibidor de p38 o remdesivir inhibidor de la replicación viral (n = 3). A , D , G ) La viabilidad celular en ausencia de infección después de la exposición a concentraciones de inhibidor indicadas se muestra en relación con los controles tratados con DMSO. B , E , H) Los niveles de infección después del tratamiento con plitidepsina (6 nM) (B), ralimetinib (6,7 μM) (E) o remdesivir (1,1 μM) (H) se midieron mediante tinción intracelular para la proteína de la nucleocápsida (N +) del SARS-CoV-2 en 24 horas después de la infección. El porcentaje de infección se muestra en relación con los controles tratados con DMSO (n = 2–3). C , F , I ) Se muestra la replicación de ARN E genómico y subgenómico del SARS-CoV-2 por μg de ARN total medido por qRT-PCR. Las líneas discontinuas indican la replicación viral en presencia de control de vehículo DMSO. Media +/− SEM (n = 3).

En conjunto, los fármacos dirigidos por el huésped plitidepsina y ralimetinib, así como el remdesivir, poseen eficacia antiviral tanto contra el linaje temprano (VIC) del SARS-CoV-2 como contra la variante del virus B.1.1.7. La plitidepsina es un tratamiento clínico aprobado para el mieloma múltiple (  ) y actualmente se encuentra en un ensayo clínico de fase 2 para el tratamiento de COVID-19 en España ( https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04382066 ) , debido a sus propiedades antivirales en cultivos celulares y modelos animales de enfermedad. En consonancia con los datos anteriores, hemos demostrado recientemente que plitidepsin es 27,5 veces más potente contra SARS-CoV-2 de principios del linaje de remdesivir y ejerce actividad antiviral con un IC 50 de aproximadamente 1 nM ( ). La plitidepsina es un antagonista de eEF1A, que forma parte del complejo de elongación de traducción eucariota 1 y comúnmente utilizado por los virus de ARN para la traducción de ARNm (  ). Por lo tanto, el tratamiento con plitidepsina puede interferir con éxito con la replicación viral y podría extenderse a otras infecciones virales como un antivírico de acción amplia, lo que sería consistente con informes anteriores que sugieren que los virus son más susceptibles a los reguladores de la proteostasis que sus huéspedes celulares (  ).

Ralimetinib, un inhibidor de la proteína quinasa activada por mitógenos p38, se desarrolló inicialmente para el tratamiento de pacientes con cáncer avanzado (  ;  ). p38 está involucrado en diferentes procesos celulares que incluyen la traducción de proteínas, el ciclo celular, la inflamación y la muerte celular (  ). Anteriormente informamos que p38-MAPK está fuertemente regulada durante la infección por SARS-CoV-2 y los medicamentos dirigidos a estas vías mostraron actividad antiviral in vitro., lo que sugiere que el SARS-CoV-2 se basa en la activación de p38 para la replicación viral. Se han informado hallazgos similares para SARS-CoV y HCoV-229E, donde se observa la activación de p38 durante la infección viral y la inhibición de esta vía puede limitar la replicación viral (  ;  ). Además, hemos demostrado que el bloqueo de la activación de p38 reduce significativamente la expresión de citocinas (  ), lo que sugiere que apuntar a esta vía puede ser beneficioso en casos graves de COVID-19, donde la desregulación inmune y el daño tisular se asocian con un mal pronóstico de la enfermedad .

Si bien las mutaciones en la proteína Spike en la variante B.1.1.7 podrían contribuir potencialmente a una mayor transmisibilidad, las mutaciones en otras proteínas virales también podrían estar influyendo. Será interesante determinar si estas mutaciones alteran el panorama de interacción proteína-proteína humana SARS-CoV-2-proteína humana y cómo lo hacen (  ;  ). Además, el análisis de los cambios celulares en el huésped durante la infección con los diferentes linajes, incluida la monitorización de las alteraciones en las redes de señalización a través de modificaciones postraduccionales (es decir, fosforilación (  ) y ubiquitinación), así como las dependencias genéticas del huésped (  ;  ; ), pueden ayudar a comprender estas y futuras variantes.

Este estudio se basa en nuestra caracterización previa de los medicamentos dirigidos al huésped como antivirales para la infección por SARS-CoV-2 (  ;  ;  ; ) y demostrar las ventajas de reutilizar medicamentos que están clínicamente aprobados con farmacocinética y perfiles de seguridad conocidos, ya que pueden pasar rápidamente a ensayos clínicos. Además, nuestros datos fomentan el desarrollo preclínico y clínico continuo de terapias antivirales dirigidas al huésped para COVID-19, ya que dirigirse a los factores esenciales del huésped necesarios para la replicación viral proporciona una estrategia para mantener la eficacia contra las variantes emergentes del SARS-CoV-2. Es importante destacar que, dado que estos medicamentos inhiben los procesos celulares comúnmente empleados por diferentes virus para asegurar la infección, estas y otras terapias dirigidas al huésped podrían usarse para responder rápidamente a futuros brotes virales. 

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Tesla. Su CEO Pone a Parir a los Cortos ... " No Puedes Vender una Casa Que No Tienes ; No Puedes Vender un Coche Que No Tienes , Pero ¡¿ Puedes Vender Acciones Que No Tienes ?! . Esto es una Mierda . La Venta a Corto es una Estafa ", Ha Afirmado Tajante . Post By Celtia .


El Mercado está viviendo una revolución en estos últimos compases de enero que algunos creen y esperan que sea pasajera pero que para otros es el germen de algo muy grande que se avecina y que va cambiar la forma de hacer las cosas del mercado a base de dinamitar los cimientos actuales.

El caso GameStop, con el grupo de foreros que se ha unido para hacerla subir a muerte, provocando pérdidas millonarias a los fondos que habían apostado a la baja por la empresa, tiene importantísimas implicaciones y ha generado reacciones de todo tipo. El bróker Robinhood restringió este jueves las transacciones con GameStop y otras compañías también en el punto de mira de los foreros y ha sido objeto de fortísimas críticas, además de tener que afrontar una demanda colectiva por manipulación del libre mercado. El COE de Robinhood ha defendido su decisión alegando que no pueden permitir esta volatilidad y que deben acatar una serie de normas y restricciones a la hora de desarrollar su actividad.

La Casa Blanca está siguiendo de cerca esta situación. La demócrata Alexandria Ocasio-Cortez ha arremetido duramente contra las restricciones de Robinhood y otras plataformas impuestas a GameStop, afirmando que esta forma de actuar exige un escrutinio más cercano por parte de los reguladores y el Congreso de EEUU. Ocasio-Cortez dijo en una serie de tuits que estaría a favor de celebrar audiencias para aclarar qué ha ocurrido en relación con estas restricciones.

Y LLEGA MUSK

A todo esto se suma el CEO de Tesla, Elon Musk, que parece estar siguiendo muy de ceca todo lo que está sucediendo en torno a GameStop. Hace unos días propició que siguiera la fiebre compradora de los foreros al publicar un tuit con una sola palabra:"¡Gamestonk!". Ahora, después de ver lo que ha sucedido con Robinhood, Musk ha mostrado su apoyo a Ocasio-Cortez y ha vuelto a demostrar su odio a los bajistas.

"No puedes vender una casa que no tienes; no puedes vender un coche que no tienes, pero ¡¿puedes vender acciones que no tienes?! Esto es una mierda. La venta a corto es una estafa", ha afirmado tajante. ...

ZEPZELCA ( Lurbinectedin de PharmaMar ) Combinado con CAMPTOSAR ( Irinotecan de Pfizer ) . Presentación Oral en el IASLC 2020 World Conference on Lung Cancer, Which Will Be Held Virtually From January 31st .

Titulo de la Presentación Oral :

Lurbinectedin With Irinotecan in Relapsed Small Cell Lung Cancer. Results From the Expansion Stage of a Phase I-II Trial .

In The Oral Presentation, New Data on The Lurbinectedin Combination With Irinotecan in Relapsed Small Cell Lung Cancer (SCLC) Will Be Presented, Under The Abstract 'Lurbinectedin With Irinotecan In Relapsed Small Cell Lung Cancer. Results From The Expansion Stage Of a Phase I-II Trial'.

This Combination Of Lurbinectedin And Irinotecan Demonstrated Efficacy in SCLC After Failure Of First-Line therapy, including 'remarkable activity in patients with resistant disease (CTFI .

Al Ser una Presentación Oral ... De Momento Tan Solo Tenemos los Resultados  Obtenidos a Fecha de  12 Agosto 2020 ...  Que Ya Anticipan Muy Muy Muy Buenos Resultados Con Un Beneficio Clinico del 71 %  ... Logicamente Estos Resultados Pueden Tener Variaciones en la Presentación Oral de Este Domingo .

Resultados con Fecha 12 Agosto 2020 : 

Lurbinectedin is a Novel anti-cancer agent that exerts antitumor activity through inhibition of trans-activated transcription and modulation of the tumor microenvironment.

 In June 2020, the US FDA granted accelerated approval to lurbinectedin (ZepzelcaTM) for the treatment of adult patients (pts) with metastatic small cell lung cancer (SCLC) with disease progression on or after platinum-based chemotherapy based on the results of a phase II study (Trigo et al. Lancet Oncol 2020). Preclinical evidence of synergism was observed for lurbinectedin in combination with irinotecan.

Methods

Antitumor activity and the safety of lurbinectedin in combination with irinotecan in SCLC were evaluated in this phase I-II trial. Data are presented here for advanced SCLC (pts) with no more than 2 prior lines of chemotherapy and ECOG performance status (PS) score of 0-1 treated at the recommended dose (RD).

Results

21 pts were treated at the RD (lurbinectedin 2 mg/m2 Day 1 + irinotecan 75 mg/m2 Days 1 and 8 every three weeks + prophylactic G-CSF); all were evaluable for safety and efficacy. Baseline characteristics were: males/females, 48%/52%; median age, 61 years (52-74); ECOG PS score 0/1, 24%/76%; chemotherapy-free interval (CTFI) ≥90 days/<90 days, 62%/38%; number of prior lines, 1 (62%), 2 (38%); prior immunotherapy (19%); liver metastases 48%; CNS involvement 24%. At cut-off (12 August 2020), 11 patients were still on treatment.

 Adverse events (AEs) included:

Grade (G) 4 neutropenia in 6 pts (28.6%); febrile neutropenia in 2 pts (9.5%); no G4 anemia or G4 thrombocytopenia. Severe non-hematological toxicities were G3 only and consisted mainly of fatigue in 4 pts (19.0%), diarrhea in 3 pts (14.3%), and vomiting in 1 pt (4.5%). No deaths or discontinuations were reported due to treatment-related AEs.

Conclusion

The combination of lurbinectedin and irinotecan demonstrated efficacy in SCLC after failure of first-line therapy, including remarkable activity in pts with resistant disease (CTFI <90 days) and in the 3rd line setting. Toxicity was transient and manageable, and consisted mainly of hematological abnormalities, fatigue and diarrhea. Further development of this combination is warranted in pts with SCLC. Updated results of this cohort will be presented.

All patients

(n=21)

CTFI

Setting

90 days (n=13)

<90 days (n=8)

2nd line (n=13)

3rd line (n=8)

Median number of cycles

(range)

7

(1-16)

9

(3-16)

3

(1-7)

7

(3-16)

7

(1-13)

Overall Response Rate (PR)

62%

69%

50%

77%

37%

Clinical Benefit Rate (PR+SD>4m)

71%

85%

50%

77%

63%

Disease Control Rate (PR+SD)

90%

100%

75%

100%

75%

Median DOR (m)

(95% CI)

5.7+

(2.8-n.r.)

6.7+

(3.0-n.r.)

3.2+

(2.8-3.7)

6.7+

(3.0-n.r.)

3.0+

(2.8-n.r.)

Median PFS (m)

(95% CI)

6.2+

(4.1-n.r.)

8.5+

(4.3-n.r.)

3.7+

(0.7-5.0)

8.1+

(3.3-n.r.)

4.3+

(0.7-n.r.)

Median follow-up: 8.7 months

+ patients ongoing; CTFI, chemotherapy-free interval; DOR, duration of response; m, months; n.r. not reached; PFS, progression-free survival; PR, partial response; SD, stable disease.